Volume 15, Issue 2

Es wird eine experimentelle Methode für die radiochemische Bestimmung kleiner Löslichkeiten unter einer inerten Gasatmosphäre beschrieben. Die Löslichkeit von Strontiumrhodizonat in Wasser wurde zu 5,65 ·10 -5 Mol/l (± 3%) bei 20 °C bestimmt. Als Leitisotop wurde 90 Sr verwendet.

Durch Nucleinsäure-Fraktionen, die aus infizierten Hühnerembryonen gewonnen wurden, wird im bebrüteten, befruchteten Hühnerei die Vermehrung von normalem Eastern-Equine-Encephalomyelitis (EEE) -Virus angeregt. In Gewebekulturen aus embryonalen Hühnerzellen lassen sich mit Nucleinsäure-Fraktionen Plaques erzeugen. Die Infektiosität der Nucleinsäure-Fraktionen unterliegt verschiedenen inhibitorischen Einflüssen durch Substanzen, die neben der infektiösen hochmolekularen Ribonucleinsäure (RNS) in ihnen enthalten sind. Diese Inhibitoren können durch Alkohol-Präzipitation der RNS und durch Behandlung mit Desoxyribonuklease teilweise entfernt bzw. inaktiviert werden. Die infektiöse RNS in den Nucleinsäure-Fraktionen stammt nicht von den EEE-Virus Elementarteilchen, sondern von einem ribonuklease-empfindlichen virusspezifischen Material, welches in den infizierten Zellen vorliegen muß.

After tryptic digestion of TMV protein the N-terminal peptide could be isolated by sedimentation between pH 3 and 5. The amino acid sequence was determined by digestion with chymotrypsin and with pepsin and by partial hydrolysis with formic acid. A proposed structure for the peptide is given.

In darkened nucleate and enucleate cell parts of the uninuclear marine green alga Acetabularia mediterranea the protein content decreases. This holds for the total protein as well as for chloroplast protein. It seems, that also a decrease of cytoplasmic protein occurs, but that it is masked by protein released from the chlloroplast fraction. No difference could be found between the decrease of the protein in nucleate and enucleate cell parts. Beside the total protein decrease a transport of stalk protein into the rhizoids occurs in the nucleate parts. The results are compared with those found at starving nucleate and enucleate halves of Amoeba.

Die elektronenmikroskopischen Untersuchungen an Pollenschläuchen von Fritillaria imperialis und Lilium candidum haben ergeben, daß das vegetative Cytoplasma locker gefügt, aber sehr reich an Strukturen ist, wie dies der hohen physiologischen Aktivität der Pollenschläuche während ihres schnellen Wachstums durch den Griffel entspricht. Die spermatogenen Zellen sind von diesem Plasma durch eine Doppelmembran deutlich abgegrenzt. In ihrem sehr dichten Grundcytoplasma sind Mitochondrien, verhältnismäßig wenige Plastiden und ergastoplasmatische Lamellenstrukturen enthalten. Die Plastiden liegen als Proplastiden vor und besitzen einen typischen Prolamellarkörper.

Chloroplasten wurden aus wäßrigem und nicht-wäßrigem Milieu isoliert. Berechnungen auf Grund von Protein- und Chlorophyllbestimmungen ergaben einen Chloroplastenanteil am Gesamtprotein von 25—35% bei Isolierung der Chloroplasten aus wäßrigem Medium, demgegenüber aber von etwa 60% bei Isolierung aus nicht-wäßrigem Medium. Die hohen Unterschiede lassen sich zum größten Teil auf starke Proteinverluste infolge Auswaschens beim Arbeiten in wäßriger Lösung zurückführen, in geringerem Maße auf eine Verunreinigung der aus nicht-wäßrigem Milieu erhaltenen Chloroplasten mit Cytoplasmaprotein.

Auf dem Wege über Enzymbestimmungen an Chloroplasten und der Gesamtzelle läßt sich die Verunreinigung aus nicht-wäßrigem Milieu isolierter Chloroplasten mit Cytoplasmaprotein ermitteln. Sie belief sich bei sorgfältiger Reinigung der Chloroplasten auf 6 Prozent. Unter Berücksichtigung der Verunreinigung ergibt sich ein Chloroplastenanteil am Gesamtprotein von 55—60% (vgl. den vorangegangenen Beitrag). Da bei Isolierung von Chloroplasten aus wäßrigem Milieu nur 25 —35% erhalten wurden, müssen bei diesem Verfahren bis zu 50% der Chloroplasten-Proteine durch Auswaschen verlorengegangen sein. Die Gefahr des Auswaschens ist bei verschiedenen Enzymen unterschiedlich groß: So wird Aldolase wenig von einem Auswaschungsverlust betroffen, während die Aktivität der Äpfelsäuredehydrogenase bei der Isolierung um mehr als 90% zurückging. Infolge der Verlustmöglichkeit durch Auswaschen läßt sich der tatsächlich in den Chloroplasten lokalisierte Anteil der untersuchten Fermente an der Gesamtaktivität der Zelle nur an Chloroplasten bestimmen, die aus nichtwäßrigem Milieu isoliert wurden. Diese Bestimmung wurde für acht untersuchte Fermente vorgenommen: Ein hoher Anteil des Aldolase-Gehaltes, etwa 50% der Gesamtaktivität der Glutamat-Oxalacetat-Transaminase, 30% der Aktivität der Äpfelsäuredehydrogenase und 10—20% der Glutaminsäuredecarboxylase- und Katalase-Aktivität sind in den Chloroplasten lokalisiert, während Glutaminsäuredehydrogenase, Pyruvatkinase und Glutamat-Pyruvat-Transaminase dort wahrscheinlich nicht vorkommen.

Experiments on rabbits show the importance of genes in the development of radiation damage to the lens. The two well recognized types of radiation damage to the lens, clouding and inhibition of growth, are dependent on age too. It was shown that the specific loci which reduce cell metabolism increase the radioresistance of the lens. The decrease in metabolism of the lens with age also increases its radioresistance. The consequences of these observations are discussed.

Es wurden chemisch definierte einfache Nährmedien für Zellkulturen entwickelt, die das Substrat für das jeweils zu untersuchende Enzym-System enthalten. Der Ablauf der Reaktion wird im Gewebekultur-Überstand bestimmt. Es wurde keine Linearität zwischen dem Proteingehalt der Nährflüssigkeit und dem Abbau des Substrats gefunden, wenn kein erheblicher Zerfall der Zellen vorhanden war. Dies spricht dafür, daß vor allem intrazelluläre Enzyme für den Substratabbau verantwortlich sind, zumal in diesen verbesserten Versuchsmedien keine nennenswerten Hydrolase-Aktivitäten gefunden wurden. Die morphologische und funktionelle Integrität der Zellen während der Experimente wurde durch Vitalfärbung optisch kontrolliert. Es wurden die relativen, bzw. spezifischen Aktivitäten von saurer und alkalischer Phosphatase, 5-Nukleotidase, ATP-ase und RN-ase intakter Gewebekulturen gemessen. Ferner wurde der Einfluß von Salzen bzw. anderen Substanzen und bekannten „kompletten“ Nährböden auf das Überleben und die Enzymaktivitäten von 4 verschiedenen Zellarten untersucht und mit den „analytischen“ Nährlösungen verglichen. Die praktische Bedeutung dieser Methodik für Enzym- und andere biochemische Bestimmungen in Zellkulturen wurde experimentell bewiesen, wie auch ihre Anwendbarkeit für das Studium verschiedener Probleme der Zellphysiologie bzw. Zellpathologie.

Bei tierexperimentellen Untersuchungen war es erforderlich, in die Blutbahn eingebrachten O 2 in der Atmungsluft nachzuweisen, um dessen etwaige Abatmung erfassen zu können. Da radioaktive Sauerstoff-Isotope mit einer für die Versuche ausreichend langen Halbwertszeit nicht existieren, wurde zur Markierung das stabile Sauerstoff-Isotop 18 O verwendet. Die relative Häufigkeit der stabilen Isotope 16 Ο und 18 O im O 2 und CO 2 der abgeatmeten Luft wurde mit einem Massenspektrometer vom Nier - Typ analysiert. Die räumliche Trennung von Versuchs- und Meßort führte zu einer Anzahl methodischer Schwierigkeiten, deren Überwindung beschrieben wird. Die Ergebnisse zeigen, daß auch dort, wo kein Massenspektrometer unmittelbar zur Verfügung steht, ein Arbeiten mit stabilen Sauerstoff-Isotopen möglich ist, sofern die Probenahme unter Berücksichtigung gewisser Vorsichtsmaßregeln vorgenommen wird.

Der Mensch kann bekanntlich die Richtung eines Schalles durch die Laufzeit- und Lautstärkeunterschiede, mit denen der Schall an seinen Ohren eintrifft, recht gut feststellen. Über den Charakter und die Genauigkeit dieses Ortungsvermögens unter den verschiedensten Bedingungen existieren vielfältige Untersuchungen 1 . Die Schallquelle läßt sich im allgemeinen um so besser lokalisieren, je mehr sie in der Richtung der Mittellinie des Kopfes liegt; daher ist der Mensch bestrebt, seinen Kopf in diese Richtung zu drehen. Er wird dies so lange tun, bis das Schallereignis an beiden Ohren gleich empfunden wird. Die Bewegung wird von der Abweichung von diesem Zustand kontrolliert, und es ist naheliegend zu vermuten, daß sie nach regelungstechnischen Gesichtspunkten durchgeführt wird. Auf eine Anregung von Prof. Dr.-Ing. E. h. K. KÜPFMÜLLER hin wurden nun Versuche unternommen mit dem Ziel, über die Gesetzmäßigkeiten dieser Kopfbewegung etwas aussagen zu können.

Di-cyclopentadienyl-molybdän-di-hydrid (C 6 H 5 ) 2 MoH 2 und Di-cyclopentadienyl-wolfram-di-hydrid (C 5 H 5 ) 2 WH 2 lassen sich durch Umsetzung von MoCl 5 und WCl 6 mit NaC 5 H 5 in großem Überschuß in Tetrahydrofuran und nachfolgende Sublimation erhalten. Die durch Lösen in Säuren nach (C 5 H 5 ) 2 MeH 2 + Η ⊕ → (C 5 H 5 ) 2 MeH 3 ⊕ komplex sich bildenden gelben Kationen (C 5 H 5 ) 2 MoH 3 ⊕ und (C 5 H 5 ) 2 WH 3 ,⊕ bilden mit Laugen z. T. wieder die freien Hydride zurück und können daher zu deren Reinigung verwendet werden. Der Diamagnetismus derselben entspricht Edelgas-Konfigurationen, die durch Einbeziehung der Gesamtheit aller Ring-n-Elektronen und jeweils zwei an die Metalle gebundene H-Atome zustande kommen. IR-spektroskopische Befunde bestätigen diese Vorstellung. Dipolmessungen an (C 5 H 5 ) 2 WH 2 in Benzol beweisen einen unsymmetrischen Bau mit vermutlich schräg gestellten, jedoch noch zentrisch gebundenen Ringen.