Volume 18, Issue 2

Zur weiteren Vorarbeit für die gaschromatographische Sequenzanalyse von Peptiden wurden Dipeptide untersucht, die trifunktionelle Aminosäuren enthalten. In Form der N-TFA-Dipeptid-dimethylester lassen sich α- und γ-Dipeptide der Glutaminsäure trennen. Bei tyrosin-haltigen Dipeptiden empfiehlt sich die O-Trimethylsilylierung der phenolischen Hydroxylgruppe oder deren Methylierung mit Diazomethan. Serin- oder threonin-haltige Dipeptide werden am besten vor der Gaschromatographie in die O-Trimethylsilyl-N-TFA-dipeptid-methylester mittels Hexamethyldisilazan verwandelt. Cystein- und cystin-haltige Verbindungen werden mit Raney - Nickel in Alanin-Verbindungen überführt. Hierbei gehen Methionin-Verbindungen in Derivate der α-Aminobuttersäure über. Zahlreiche Verbindungen der aufgeführten Gruppen wurden hergestellt, und ihre relativen Retentionswerte gegenüber Myristinsäure-methylester als Standard ermittelt.

Salicylaldoxime at a concentration of 10 -2 -m. is an inhibitor of the Hill - reaction and therefore also of aerobic photophosphorylation in isolated chloroplasts. This might indicate a functional role for copper in the electron transport system of photosynthesis. At a concentration of 10 -3 -m. and lower, salicylaldoxime is not an inhibitor, but a cofactor of aerobic photophosphorylation. This is due to its hydroxylation to the p-hydroquinone, which is the actual cofactor. This p-hydroxylation, which is probably catalyzed by a peroxidase, takes place only with salicylaldehyde and its oxime, but not with other phenols, whether they have a carbonyl function attached to the phenyl ring or not. A number of o- and p-hydroquinones with a carbonyl function at the phenyl ring and two naphthohydroquinones, of which the corresponding quinone cannot be prepared by chemical means, are reversibly oxidized and reduced in photosynthetic phosphorylation in chloroplasts. A possible explanation is that these hydroquinones are oxidized only to the semiquinone level and rapidly reduced again.

Die indirekte Wirkung von Röntgenstrahlen einer Dosis von 0,08 bis 7.5 Millionen r auf eine 2 · 10 -2 -m. wäßrige Tryptophanlösung wurde mit Hilfe chemischer und physikalisch-chemischer Arbeitsmethoden (Hochspannungs-Elektrophorese) untersucht. Der Einfluß der Dosis, Dosisleistung, Temperatur und die durch oxydierend wirkende Radikale (HO 2 ) ausgelösten Reaktionsschritte bei Bestrahlung in Sauerstoffatmosphäre wurden in qualitativer Hinsicht geprüft. Aus der Vielzahl der strahlenchemisch gebildeten Abbauprodukte konnten mit Sicherheit nachgewiesen werden: Glycin, α-Alanin, Asparaginsäure, Kynurenin, 3-Hydroxykynurenin, 3-Oxyanthranilsäure und Tryptamin. Schließlich wurde versucht, die experimentell gewonnenen Ergebnisse mit Hilfe von Radikalwirkungen, die sich auf a) Decarboxylierungen b) und Veränderungen des Kohlenstoff-Gerüstes beziehen, zu deuten.

Eight strains of Newcastle disease virus (NDV) have been examined using the technique of negative contrast electron microscopy, before and after treatment with ether. There is considerable variation in the shape and size of particles in any one strain, and the degree of this pleomorphism varies from strain to strain. The two common features of all the strains are the internal ribonucleoprotein and the rosette-like haemagglutinin formed by disruption of the coat with ether. The effect of ether is to disrupt the particles, but the ease of disruption varies from strain to strain. The products of ether treatment are the internal ribonucleoprotein and the haemagglutinin, which consists of portions of the outer coat. Besides these, the coat itself may in some strains appear almost intact, but stripped of its projections, after ether treatment. With the strains whose pathogenicity was known it has not proved possible to relate structure to degree of pathogenicity.

UV inactivated KAPPA can be reactivated like other temperate phages by plating on uvirradiated host cells (indicator). The capacity of the indicator Serratia HY for multiplication of unirradiated KAPPA was about 0.1% survivors (colony formers). The induction of clear plaque (c·) mutants by irradiating extracellular KAPPA and plating on untreated indicator can be increased further about 2 to 4 times by using UV irradiated indicator. The increase of the number of c mutants under the latter conditions, with increasing UV dose given to the phage, was never a firstorder reaction. The highest frequency of c mutants obtained was about 4.5 per cent. Plating of unirradiated KAPPA on irradiated indicator (lowest survival fraction was 0.01%) never increased the spontaneous mutation rate to c. Two c mutants studied in detail belong to two different cistrons as shown in a complementation test (map distance about 5.3%). Only one of both was revertible to the phenotype c + spontaneously and with a higher rate by UV. However, as shown in crossing experiments with the wild type, the backmutants do not have the original genotype but originated from mutations in at least two different intragenic suppressor loci; the map distances between them and the original c mutation were 0.64% and 0.13 per cent. Host range (h) and virulent (v) mutants could not be induced by irradiation of the free phage and plating on untreated indicator. This indicates that the UV induced high mutability of the c loci in KAPPA represents an exceptional case of behavior (UV-hot spot). Some unstable h mutants could be isolated by plating irradiated phage on irradiated indicator.

Zur Ermittlung der RNS in Pflanzenmaterial wurde die Methode von Schmidt-Thannhauser modifiziert, so daß nicht nur die Gesamtmenge an RNS, sondern auch deren Basenzusammensetzung bestimmt werden. Nach Entfernung der säurelöslichen Phosphate, der Lipoide und eines Teils der Farbstoffe wird die RNS in alkalischer Lösung zu Mononucleotiden hydrolysiert und diese durch Säulenchromatographie getrennt. Die Chromatographie wurde zu einer Routine-Methode ausgearbeitet, die ohne kostspielige Apparaturen und mit geringen Mengen an Elutionsmittel durchführbar ist. In verschiedenen Versuchsreihen wurde die optimale Hydrolysezeit mit 1-n. KOH bei 37 °C zu 22 Stdn. ermittelt. Unter diesen Bedingungen wird nicht nur CMP, sondern auch AMP und UMP teilweise zerstört. Die infolgedessen notwendigen Korrekturfaktoren wurden ermittelt.

The resting anterior byssal retractor muscle of Mytilus edulis (ABRM) contains 1 -1.2 μmol ATP and 0.6 - 0.8 μmol ADP per g wet weight, traces of AMP and 0.1 - 0.2 μmol GTP plus UTP. The ATP content and the ratio of ADP : ATP remains almost constant during contraction, catch and subsequent serotonin induced relaxation, IMP could not be detected, not even during thaw contracture. Consequently the catch (viscous tone, fused state) is a reversible rigor distinct from rigor in vertebrate skeletal muscle which is caused by ATP deficiency. ATP produces a very much stronger contraction in isolated actomyosin systems of ABRM than UTP, ITP and GTP.

Experimental evidence is given for the function of plastoquinone in Photosynthesis: Plastoquinone Q II is the electron acceptor of Chla II in lightreaction hv II

From action spectra of separated light reactions the function of different chlorophylls in photosynthesis have been estimated.

Um die Frage nach dem Vorliegen von Mitochondrien in der atmungsdefekten, cytoplasmatischen „petite“-Mutante von Saccharomyces cerevisiae zu klären, wurden aus schonend hergestellten Homogenaten normaler Bäckerhefe und der „petite“-Mutante die in der Zentrifuge zwischen 1500 und 26 300 g sedimentierenden cytoplasmatischen Partikel isoliert und im Saccharose-Dichtegradienten fraktioniert. Die erhaltenen Rohsedimente sowie die einzelnen Fraktionen wurden enzymatisch und elektronenmikroskopisch untersucht. Dichtegradienten-Gleichgewichtszentrifugierung des Sedimentes aus normaler Hefe ergab bei schonendem Homogenisieren zwei Banden, deren spezifisch leichtere (Dichte 1,19 g · cm -3 ) die Mitochondrien des Rohsedimentes in gereinigter Form enthielt. Die spezifisch schwerere Bande (Dichte 1,23 g · cm -3 ) bestand aus offenen oder geschlossenen Doppelmembranen, die eine sehr aktive, Mg 2 ⊕ -stimulierte ATPase enthielten, jedoch frei von typisch mitochondralen und mikrosomalen Enzymen waren; diese Membranen sind vermutlich Trümmer des endoplasmatischen Retikulums der Hefezelle. Nach länger dauernder Homogenisierung der Zellen konnte noch eine dritte, meist sehr schwache, Bande beobachtet werden (Dichte 1,14 g · cm -3 ), die wahrscheinlich aus Mitochondrienfragmenten besteht. Die Auftrennung des Sedimentes der „petite“-Mutante ergab ein prinzipiell gleiches Bild. Auch bei der Mutante zeigten die Atmungsenzyme Succinatdehydrogenase und DPNH-Cytochrom-c-Reduktase eine charakteristische mitochondrale Verteilung im Gradienten (Dichte 1,19 g · cm -3 ); sie sind also an Mitochondrien gebunden. Von den getesteten Enzymen fehlte lediglich Cytochromoxydase. Die Menge der Mitochondrienfragmente sowie der spezifisch schwereren Membranfraktion (Dichte 1,19 g · cm -3 ) war meist stark vermehrt. Der Nachweis von Mitochondrien auch in der „petite“-Mutante ist mit jenen bisherigen Vorstellungen über diese erbliche Veränderung unvereinbar, die die Abwesenheit von Mitochondrien in der Mutante voraussetzen. Die bei der „petite“-Mutation ausfallenden extrachromosomalen Faktoren mit genetischer Kontinuität können also nicht mit den Mitochondrien identisch sein.

The mechanism underlying the endogenous diurnal periodicity of biological processes can be considered a self-sustained oscillation, which can be entrained to an external cycle. In such oscillations the phase-angle of the entrained cycle depends upon the spontaneous frequency (free-running period) of the oscillator. The activity rhythm of lizards kept in constant light, and in a sinusoidal 24-hour temperature cycle, showed entrainment to this cycle. The phase of the entrained rhythm depended on the spontaneous frequency which was expressed in constant conditions occurring immediately before or after the exposure to the extraneous cycle. This is the first experimental demonstration showing the dependence of phase on the free-running period in an endogenous diurnal rhythm.