Volume 41, Issue 1

Background: Since the introduction of luminescent oxygen channeling immunoassays (LOCI™)-based assays in the daily laboratory routine of tumor marker measurements, only a small number of method comparisons with established immunoassays have been published. We performed a method comparison between LOCI™-based tumor marker assays for Dimension™ VISTA and electrochemiluminiscent immunoassays (ECLIA) for Cobas™ e411, for α-fetoprotein (AFP), carcinoembryonic antigen (CEA), CA 125, CA 15-3, CA 19-9, prostate-specific antigen (PSA) and free PSA (fPSA). Methods: Tumor markers were assessed in 1088 sera from routine diagnostics on the Dimension™ VISTA 1500 and Cobas™ e411 analyzers. Results: Strong correlations were achieved for PSA (r=0.999), AFP (r=0.994) and CEA (r=0.993). Results were quite comparable as only minor slopes of 1.05 (PSA), 1.02 (AFP) and 0.94 (CEA), respectively, were found. However, correlations for CA 125 (r=0.976), CA 19-9 (r=0.960), fPSA (r=0.950) and CA 15-3 (r=0.940) were only moderate, and considerable slopes were observed for these markers with higher values for CA 19-9 (slope 1.50) and lower ones for CA 15-3 (0.76), fPSA (0.75) and CA 125 (0.64), for Dimension™ VISTA 1500. Conclusions: We found excellent correlations and comparable values for AFP, CEA and PSA, but only moderate correlations for fPSA, CA 125, CA 15-3 and CA 19-9. The slopes for CA 19-9, CA 15-3, fPSA and CA 125 have to be considered when analysis methods for tumor markers are changed.

Zusammenfassung Hintergrund: Der Dexamethason-Kurzzeit-Suppressionstest (DST) wird als Screeningverfahren in der Diagnostik des Cushing-Syndroms (CS) angewendet. Allerdings können Faktoren wie die variable Resorption, sowie ein gesteigerter Metabolismus von Dexamethason (DXMS) die Testergebnisse beeinflussen und zu falsch positiven Resultaten führen. Das Ziel dieser Studie war es daher den Einfluss von Geschlecht, Body-Mass-Index (BMI) und Alter auf den DXMS-Metabolismus zu untersuchen. Methoden: Bei insgesamt 183 Testpersonen wurde ein regulärer 2 mg DST durchgeführt. Nach Ausschluss von Patienten (Pat) mit CS, Depression, Störungen der Leber- und Nierenfunktion, sowie Pat unter Medikation mit Cyp3A4-modulierenden Pharmaka, erfolgte die statistische Auswertung der Daten von 72 Pat und 66 gesunden Testpersonen. Zur pharmakokinetischen Charakterisierung von DXMS und CORT wurden bei 11 Pat zusätzlich nächtliche Blutentnahmen (1, 3, 5, 7 Uhr) durchgeführt. Ergebnis: Im Rahmen des DST wurde eine ausgeprägte interindividuelle Variabilität der DXMS-Konzentration gefunden, welche invers mit dem BMI korrelierte (r=–0,24, p=0,045). Passend hierzu wiesen nicht-adipöse Pat (BMI<30 kg/m 2 , n=29) im Vergleich mit adipösen Pat (BMI>30 kg/m 2 , n=43) im Mittel signifikant höhere morgendliche DXMS-Werte auf (1,66±0,71 ng/mL vs. 1,31±0,57 ng/mL, p=0,026). Das simultan gemessene CORT korrelierte weder mit dem BMI noch mit der DXMS-Konzentration. In der Analyse der Pharmakokinetik wurde die maximale DXMS-Konzentration um 3 Uhr erreicht. Danach sank DXMS kontinuierlich auf 59,1% des medianen Spitzenwertes ab (8 Uhr). Die morgendlichen DXMS-Werte korrelierten mit der DXMS-AUC (r=0,75, p=0,013), jedoch bestand keine Korrelation zwischen den morgendlichen CORT-Spiegeln und den nächtlichen DXMS-Werten zu sämtlichen Blutentnahmezeitpunkten. Schlussfolgerung: Im Rahmen des DST besteht die Möglichkeit, dass BMI-Unterschiede Einfluss auf die Resorptionsrate und den Metabolismus von DXMS nehmen und damit die DXMS-Konzentration wesentlich verringern können. Dies scheint allerdings keinen Einfluss auf die CORT-Suppression im DST zu haben. Aufgrund dessen ist davon auszugehen, dass der DST als zuverlässiges Screeningverfahren bei adipösen Pat mit Verdacht auf CS einzustufen ist.

Zusammenfassung Hintergrund Im Zuge des deutschen E-Health-Gesetzes von 2016 wurde die DGKL aufgefordert, Vorschläge für die standardisierte Speicherung und Übermittlung von Labordaten zu erarbeiten. Wir schlagen dafür die in der Statistik weit verbreitete z-Transformation vor. Methoden Man erhält mit diesem Verfahren einen Relativwert, der angibt, um wie viele Standardabweichungen ein Messwert vom Mittelwert des Referenzkollektivs abweicht. Anhand realer Daten belegen wir die Annahme, dass die Werte gesunder Referenzpersonen durch logarithmische Transformation einer Normalverteilung angenähert werden können. Ergebnisse Kennt man somit die Unter- und Obergrenze UG und OG des Referenzintervalls, so kann man jedes Laborergebnis mit folgender Gleichung transformieren: zlog=(log(x)–(log(UG)+log(OG))/2)⋅3,92/(log(OG)–log(UG))$\eqalign{ & {\rm{zlog}} = {\rm{(log(x)}}-{\bf{ }}{\rm{(log(UG)}} + {\rm{log(OG))/2)}} \cdot {\rm{3,92/(log(OG)}} \cr & & -{\bf{ }}{\rm{log(UG))}} \cr} $ Der zlog-Wert ist leicht interpretierbar: Sein Referenzintervall liegt methodenunabhängig stets zwischen –1,96 und +1,96; stark erniedrigte oder erhöhte Laborergebnisse führen zu zlog-Werten um –5 bzw. +5. Für eine intuitive Befunddarstellung kann man zlog-Werte auch in eine kontinuierliche Farbskala, z. B. von Blau über Weiß bis Orange umrechnen. Mithilfe der Umkehrfunktion lässt sich aus dem zlog-Wert auch das theoretische Resultat einer Messmethode mit einem anderen Referenzintervall berechnen: x=UG0,5−zlog/3,92⋅OG0,5+zlog/3,92${\rm{x}} = {\rm{U}}{{\rm{G}}^{0,5{\bf{ }} - {\bf{ }}{\rm{zlog}}/3,92}} \cdot {\rm{O}}{{\rm{G}}^{0,5{\bf{ }} + {\bf{ }}{\rm{zlog}}/3,92}}$ Schlussfolgerung Unser Standardisierungsvorschlag ist ein leicht realisierbarer und effektiver Beitrag zur Verbesserung der Datenqualität und Patientensicherheit im Rahmen des E-Health-Gesetzes. Es wird gefordert, dass alle Labore künftig zusätzlich zum Originalwert den zlog-Wert zur Verfügung stellen und dass in die Protokolle für die elektronische Labordatenübertragung (HL7, LDT) ein eigenes Feld für diesen zusätzlichen Wert eingefügt wird.

Background: This study aimed to examine the expression of the gap junction proteins connexin 32 (CX32) and connexin 43 (CX43) in the epileptic foci of the brain in patients with refractory epilepsy, in order to provide insight into the pathogenesis and treatment of refractory epilepsy. Methods: The experimental group consisted of 30 patients with refractory epilepsy who received surgical treatments. The control group consisted of six patients with traumatic brain injuries who underwent emergency surgery. Expression of CX32 and CX43 was assessed by immunohistochemistry and immune electron microscopy of surgically extracted brain epileptic foci and compared with that in brain tissues of the control group. Results: The expression of CX32 and CX43 was significantly higher in the experimental group than that in the control group (p<0.001). Significantly more colloidal gold particles-labeled CX32 and CX43 were observed on the membranes of nerve cells in the experimental group than in the control group. Conclusions: Brain epileptic foci show increased CX32 and CX43 expression, suggesting that gap junctions formed by CX32 and CX43 may contribute to the incidence and progression of epilepsy.

Background: Indoleamine 2, 3-dioxygenase (IDO) is a tryptophan catabolizing enzyme which is involved in immune regulation and autoimmune disorders such as systemic lupus erythematosus (SLE). Interferon-γ (IFN-γ) is an inflammatory cytokine which is the major inducer of IDO expression. Here, we evaluated the level of IFN-γ and IDO among SLE patients in correlation with the severity of SLE. Methods: Fifty-three SLE patients and 35 age matched healthy donors were enrolled in this study. Systemic lupus erythematosus disease activity index (SLEDAI) was used to calculate the disease activity. Real-time RT-PCR and ELISA were used to evaluate the gene expression of IDO and IFN-γ plasma concentration, respectively. Results: We showed that IDO-1, IDO-2 and IFN-γ were overexpressed among SLE patients significantly (p<0.0001). There were significant positive correlations between IFN-γ with the expression of IDO-1 (r=0.722, p<0.0001) and IDO-2 (r=0.682, p<0.0001). There were also positive correlations between SLEDAI scores with IDO-1 (r=0.675, p<0.0001), IDO-2 (r=0.727, p<0.0001) and IFN-γ (r=0.907, p<0.0001). Conclusions: IDO expression and IFN-γ level could be introduced as helpful biomarkers for the determination of disease severity in SLE patients.

Background: A systematic analysis of the occurrence of red blood cell (RBC) abnormalities in β-thalassemia minor has not been performed to date. This study aimed to identify and quantify the frequency of RBC abnormalities in patients with β-thalassemia minor. Methods: We examined blood smears of 33 patients with β-thalassemia minor by light microscopy for the occurrence of 15 defined RBC abnormalities. In the case of positivity, the abnormal cells/20 high power fields (HPF) at 1000-fold magnification were counted. Results: Anisocytosis, poikilocytosis and target cells (median 42/20 HPF) were observed in all, and ovalocytes in 32 (96.9%, median 10/20 HPF) subjects. Dacryocytes (81.8%), stomatocytes (81.8%, median 10/20 HPF), elliptocytes (75.8%), cells with basophilic stippling (72.7%) and irregularly contracted cells (63.6%) were frequently, and schistocytes (15.2%), bite cells (6%) and pincer cells (3%) were occasionally found. Conclusions: Morphological abnormalities of erythrocytes are common in peripheral blood (PB) smears of patients with β-thalassemia minor. In this study, anisocytosis, poikilocytosis and target cells were apparent in all, and ovalocytes, elliptocytes, cells with basophilic stippling, dacryocytes, stomatocytes and irregularly contracted cells were observed in the majority of the analyzed slides. Our observations may be useful to improve the differential diagnosis of anemia in clinical laboratory routine.

Zusammenfassung: Kenntnisse zur Messunsicherheit sind für die diagnostische Bewertung quantitativer Messgrößen in der Laboratoriumsmedizin von Bedeutung. Die DIN EN ISO schreibt daher die Einschätzung und Validierung dieser Messunsicherheit vor. Die Arbeitsgemeinschaft „Richtwerte“ der Deutschen Vereinten Gesellschaft für Klinische Chemie und Laboratoriumsmedizin (DGKL) hat ein Konzept zur Ableitung zulässiger Grenzen für die analytische Impräzision, und die systematische Messabweichung (Bias) aus der Größe der Referenzintervalle unter der Berücksichtigung technischer Standards entwickelt. Analytische Impräzision, systematische Messabweichung und kombinierte Messunsicherheit lassen sich demnach als Funktion der empirischen biologischen Variabilität ausdrücken. Das Konzept beschreibt zudem die Möglichkeit, systematische Messabweichunen durch die Verwendung der laborinternen Referenzintervalle zu vermeiden.