Volume 39, Issue 5 - Sonderausgabe: Aktuelle Diagnostik in der Hämatologie/Fachredakteure: Carl Thomas Nebe und Hanns-Georg Klein

Zusammenfassung Die maschinelle Analyse von Veränderungen der weißen Blutzellen ist zu einem Massenparameter geworden und wird durch Hämatologieautomaten mit hohem Probendurchsatz geleistet. Die nachfolgende Stufe einer mikroskopischen Analyse eines panoptisch gefärbten Blutausstrichs durch einen erfahrenen Untersucher ist arbeitsaufwändig und teuer bei unzureichender Vergütung. Jedoch ist sie wegweisend und entscheidet über teure Spezialanalysen wie Zytogenetik und Molekulargenetik. Der Strategie der Stufendiagnostik kommt daher an dieser Stelle eine besondere Bedeutung zu. Zu diesem Thema wird ein neuer Vorschlag unterbreitet.

Zusammenfassung Eine Anämie ist definiert als eine Verminderung der Hämoglobinkonzentration unter die alters- und geschlechtsspezifische Norm. Diese beträgt nach der WHO 120 g/L für Frauen und 130 g/L für Männer. Prinzipiell gibt es viele Differentialdiagnosen, die bei der Abklärung einer Anämie ursächlich berücksichtigt werden müssen. Die Diagnose wird zusätzlich dadurch erschwert, dass Anämien häufig nicht nur eine Ursache haben, sondern multifaktoriell bedingt sind. Eine rationale Anämieabklärung sollte immer die epidemiologischen Daten und die individuelle Anamnese berücksichtigen. Eine zentrale diagnostische Rolle spielt nach wie vor die Einteilung der Anämien nach der Größe und dem Hämoglobingehalt der Erythrozyten anhand der Erythrozytenindizes. Die weltweit wichtigste Ursache einer hypochrom-mikrozytären Anämie ist der Eisenmangel, differentialdiagnostisch sind die Anämie der chronischen Erkrankungen (anemia of chronic disorders, ACD) und Thalassämien zu berücksichtigen. Die klinisch wichtigste Ursache einer hyperchrom-makrozytären Anämie sind Störungen des Vitamin-B12- und Folsäurestoffwechsels, bzw. der DNA-Synthese. Die normochrom-normozytäre Gruppe beinhaltet die meisten Anämieformen. Bei deren Abklärung sollte man nicht versuchen alle möglichen Ursachen durch ein allesumfassendes Laborpanel bereits mit der ersten Blutentnahme zu erfassen. Es ist sinnvoller schrittweise vorzugehen und zunächst nur die wichtigsten Ursachen diagnostisch abzudecken. Dies gilt insbesondere für geriatrische und multimorbide Patienten, bei denen der diagnostischen Aufwand nicht nur aus wirtschaftlichen, sondern auch aus ethischen Gründen der individuellen Prognose und den Bedürfnissen des Patienten angepasst werden sollte. Bei ungeklärten Anämien sollte eine Vorstellung bei einem Hämatologen erwogen werden, weil im Zweifelsfall auch eine Knochenmarkpunktion erfolgen muss, um die Hämatopoese genau zu beurteilen und eine hämatologische Grunderkrankung auszuschließen.

Zusammenfassung: Myelodysplastische Syndrome (MDS) sind maligne Stammzellerkrankungen, die meist im höheren Lebensalter anlässlich der Abklärung einer Zytopenie diagnostiziert werden und variable Krankheitsverläufe aufweisen. Die Diagnostik erfolgt mittels Zytologie, Zytogenetik und Histologie unter Berücksichtigung der Ausprägung der Dysplasien, des Blastenanteils in Blut und Knochenmark und zytogenetischer Befunde nach den Vorschlägen der WHO-Klassifikation. Essentiell ist eine möglichst exakte Zytologie, da die Zuordnung zu verschiedenen WHO Typen von hoher prognostischer und damit auch therapeutischer Bedeutung ist. Die akuten myeloischen Leukämien (AML) werden von den MDS anhand einer Blastenzahl von ≥20% im Knochenmark oder im Blut abgegrenzt. Die Diagnostik fusst ebenso wie bei den MDS auf den Säulen der Morphologie, Zytogenetik und Histologie. Zusätzlich haben die Immunphänotypisierung und die Ergebnisse molekulargenetischer Analysen eine grosse Bedeutung. Letztere sind für die Prognose zusammen mit der Zytogenetik von zentraler, therapiesteuernder Relevanz. Zur Bestimmung der minimalen Resterkrankung (MRD) werden die Immunphänotypisierung und molekulare Marker verwendet.

Zusammenfassung: Die myeloproliferativen Neoplasien (MPN) gehen auf klonale Stammzellveränderungen zurück und zeigen eine unterschiedliche Knochenmarksmorphologie. Die Differenzialdiagnose zwischen den drei BCR-ABL1 -negativen Entitäten essentielle Thrombozythämie, Polyzythaemia vera und primäre Myelofibrose ist häufig schwierig und sollte nach aktuellen Erkenntnissen auf den Kriterien der WHO basieren. Die Entdeckung neuer molekulare Marker wie Calreticulin (CALR) erlaubt eine bessere Abgrenzung einer MPN von reaktiven Veränderungen, wobei der alleinige Mutationsnachweis für die differenzialdiagnostische Abgrenzung der einzelnen Subtypen aber meist nicht ausreichend ist. Insofern ist insbesondere in frühen Stadien der MPN, die oftmals mit einer anhaltenden Thrombozytose einhergehen, eine gemeinsame Betrachtung hämatologischer, molekulargenetischer, zytologischer und vor allem histomorphologischer Befunde notwendig.

Zusammenfassung: Hämoglobinvarianten, die nicht zu den bekannteren Formen der Thalassämien, Sichelzell-, HbC-, HbD-, HbE-Anomalien gezählt werden, stellen häufig eine diagnostische Herausforderung dar. Sehr gute Kenntnisse über die unterschiedliche Symptomatik und der Analytik sind Voraussetzung. Hier ist die laboratoriumsmedizinische Expertise von großer Bedeutung. Das Spektrum der Varianten ist vielfältig und kann bei mangelnder Fachkenntnis zur Fehlinterpretation führen. Hämoglobinvarianten mit niedriger Sauerstoffaffinität können sich durch Zyanose und niedrigen Sauerstoffsättigungswerten bemerkbar machen, welche mit erhöhter Sauerstoffaffinität durch Polyglobulien und die damit zusammenhängenden Komplikationen. Methämoglobinvarianten können besonders in der Pädiatrie ein differentialdiagnostisches Problem darstellen, das eine sorgfältige Begutachtung erfordert. Andere Varianten verursachen durch ihre Instabilität mehr oder weniger stark ausgeprägte Hämolysen oder auch thalassämische Syndrome, die schwere Krankheitsbilder darstellen können. Eine klare Abgrenzung ist nicht immer möglich, da sich die Klinik oft durch mehrere Eigenschaften äußert. Gemeinsam ist vielen Varianten ein autosomal dominanter Erbgang.

Cancer diagnosis and identification of novel biomarkers are a rapidly changing field and open new doors into personalized medicine. Particularly in the diagnosis of hematological neoplasia, the identification of novel biomarkers has become more important because of biological sub-classification, prognosis and targeted and individualized therapies. Therefore, techniques like blood count, morphology, cytochemistry, histology, immunophenotyping, cytogenetics and molecular genetics are essential and cannot be denied nowadays. In the last years, a broad spectrum of novel molecular biomarkers has been identified in the genetic and molecular characterization of myelodysplastic syndromes. Lots of these novel molecular biomarkers gained entry in the routine diagnostics and provide an excess profit for patients. However, to ensure a cost-effective, targeted and individualized diagnostic testing, application of existing techniques has to be weighed against each other to obtain the best possible combination of targeted diagnostics. This review summarized thus far the diagnostic-relevant morphologic, cytogenetic and molecular biomarkers in the laboratory diagnosis of hematological neoplasia.

Zusammenfassung Der Begriff Hämoglobinopathien umfasst genetisch bedingte Krankheiten, die entweder durch die Präsenz von anomalen Hämoglobinen oder Thalassämien gekennzeichnet sind. Sie zählen zu den häufigsten Erbkrankheiten der Weltbevölkerung. Aufgrund der steigenden Migrationrate spielen Hämoglobinopathien und deren Diagnose bzw. Behandlung auch in Nord- und Mitteleuropa und ebenso in Deutschland eine wichtige Rolle. Mit 200 Mio. Betroffenen gehören die Thalassämiesyndrome, hierbei hauptsächlich α- und β-Thalassämie, weltweit zu den am häufigsten auftretenden monogenen Erkrankungen. Neben den Thalassämieerkrankungen bilden die anomalen Hämoglobine die zweite große Gruppe innerhalb der Hämoglobinopathien. In diese Gruppe fallen Hämoglobine wie HbS, HbC und HbE. In dieser Arbeit wird auf die wichtigsten Hämoglobinopathien, ihrem hämatologischen Erscheinungsbild und ihrer genetischen Ursache eingegangen. Dabei liegt der Fokus insbesondere auf der Stufendiagnostik, die bei der Abklärung solcher Erkrankungen eine entscheidende Rolle spielt.

Abstract: Primary immunodeficiency disorders (PIDs) are a group of more than 300 conditions associated with inborn defects of different elements of the immune system. First symptoms usually occur during early infancy, but some PIDs may present at first in adolescence or adulthood or after infections with specific pathogens. Typically, the underlying defect results in recurrent and persistent infections that are difficult to treat. However, patients may have a variable and wide set of symptoms ranging from mild to severe and some requiring immediate lifesaving intervention. As PIDs are relatively rare and fundamental immunological knowledge is required to understand them, an accurate diagnosis is often made too late and many patients probably may remain undiagnosed. In this article, we first give an overview on the human immune system and how PIDs are classified according to clinical features and immunological defects. Next, we focus on the possibilities of immunological and molecular genetic diagnostics of PIDs. Benefits and challenges of current diagnostic methods, especially with regard to next-generation sequencing techniques, are discussed.