Volume 37, Issue 5

Zusammenfassung: Die hämophagozytische Lymphohistiozytose (HLH) ist ein Hyperinflammations-Syndrom, welchem neben genetischen Defekten insbesondere in Genen der die Immunsynapse regulierenden Proteine auch erworbene Defekte der effektiven Pathogen-Elimination zugrunde liegen. Das rasche Erkennen und zielgerichtete Diagnostizieren einer HLH ist bei weiterhin hoher Mortalitätsrate zwischen 40%–70% essentiell, um Therapieverbesserungen zu erreichen. Hierfür ist der wichtigste Schritt für den Kliniker, an eine HLH zu denken. Prolongiertes Fieber unklarer Genese, eine Hepatosplenomegalie und eine Bi- oder Panzytopenie sind die führende Symptomentrias. Bei bekannter Familienanamnese oder bekanntem Gendefekt sind rasche bestätigende Untersuchungen einzuleiten, um die häufig notwendige Stammzelltransplantation nicht zu verzögern. Insbesondere bei Erwachsenen, bei denen auch genetische Defekte mit verzögerter Manifestation vorliegen können (v.a. bei de novo EBV-Infektion), muss eine breite Diagnostik zur Ursachenforschung einer HLH angestrengt werden. Die HLH ist keine eigenständige Erkrankung. Sie ist gemeinsame Endstrecke eines Immundefekts, welcher genetisch bedingt, oder durch infektiöse, autoimmune, autoinflammatorische, maligne oder auch iatrogene Trigger (Immunsuppression, Stammzelltransplantation) erworben werden kann. Diesem breiten Spektrum der Pathogenese der HLH muss die labormedizinische Diagnostik Rechnung tragen, um dem Kliniker sehr zeitnah die klinisch zu stellende Verdachtsdiagnose zu erhärten und schnellstmöglich die Therapie einleiten zu können. Abstract: Hemophagocytic lymphohistiocytosis (HLH) is a hyperinflammatory syndrome caused by genetic and acquired defects of the molecular machinery, which regulate the cellular immune synapse. Rapid recognition of symptoms resembling HLH, and a targeted diagnostic approach are essential in improving outcome. The condition is associated with a mortality rate between 40% and 70%. For the clinician, the most important step towards diagnosing HLH is to include it in the list of potential differential diagnoses. The leading triad of symptoms consists of prolonged fever of unknown origin, hepatosplenomegaly, and bi- or pancytopeniae. A known family history or known gene mutations require rapid confirmatory testing, which facilitates the initiation of a life saving risk-adapted treatment that includes stem cell transplantation. In adults with de-novo infection with Epstein-Barr virus, a broad diagnostic approach is required to identify potential late-onset hereditary HLH. HLH is not a diagnosis, per se, but represents a common terminal pathway of diseases with the ability to trigger HLH. Such diseases include infections, malignant disorders, autoimmune or autoinflammatory diseases, and iatrogenic triggers such as immunosuppressive treatment or stem cell transplantation itself. This broad spectrum of HLH pathogenesis must be considered in order to achieve rapid diagnosis, which is a prerequisite for the initiation of rationale treatment.

Zusammenfassung: Tränentropfenerythrozyten (engl.: tear drop erythrocytes, syn. Dakryozyten) sind bei der mikroskopischen Beurteilung von Blutausstrichen wegweisend bei der Anämiediagnostik und bei der Diagnose von sogenannten leukoerythroblastischen Blutbildern. Als Begleiterscheinung finden sich Tränentropfenerythrozyten bei diversen Grunderkrankungen, welche mit einer Knochenmarkfibrose und/oder extramedullären Blutbildung einhergehen. Die Differentialdiagnose umfasst primär hämatologische Erkrankungen wie myeloproliferative Neoplasien (insbesondere die primäre Myelofibrose (PMF)), fortgeschrittene myelodysplastische Syndrome (MDS) und eine sekundäre Knochenmarkfibrose durch infiltrative Prozesse, wie z.B. eine metastatische Absiedelung von Karzinomzellen. Seltener finden sich Tränentropfenerythrozyten im Rahmen verschiedener hämolytischer Anämien, ß-Thalassämien, metabolischer Erkrankungen, bei Eisenmangelanämie, nach Bestrahlung, Toxinexposition oder im Rahmen einer autoimmun induzierten Myelofbrose. Abstract: Teardrop erythrocytes (syn. dakryocytes) play a key role in the evaluation of peripheral blood smears in patients with anemia, especially as part of the “leucoerythroblastic picture.” Teardrop-shaped red blood cells can be seen in a wide range of diseases that lead to bone marrow fibrosis, which is often accompanied by extramedullary hematopoesis. The differential diagnoses encompass primary myelofibrosis (PMF), myelodysplastisc syndromes during the late course of the disease, rare forms of acute leucemias and myelophtisis caused by metastatic carcinoma. Rarely, MF associated with post-irradiation, toxins, autoimmune diseases, metabolic conditions, inborn haemolytic anemias, iron-deficient anemia or ß-thalassaemia can lead to the formation of teardrops as visualized on peripheral blood smears.

The review of the German guidelines for quality control of medical laboratory investigations made it necessary to determine the actual standard of imprecision and correctness of CD4 and CD8 lymphocyte subsets in peripheral blood. In this study, known laboratories performing that test were approached directly or indirectly via the manufacturers of reagents and equipment, in order to report the data they obtained by validation and internal quality control. In addition, the authors asked for reference ranges and results of the external quality assessments. Due to the fact that no reference methods exist, there are different procedures in the field and round-robin definition of subgroups with different target values obtained by consensus. This article describes the different procedures and technologies as well as the given spread of results. The report also covers the remaining lymphocyte subsets to gain a better understanding of the context and background of the technology.

Galectin-3 is a carbohydrate-binding protein involved in inflammatory and fibrotic processes in various tissues. In the heart, galectin-3 activation has been associated with progression of cardiac fibrosis leading to cardiac remodeling and heart failure development. Clinical studies have shown that galectin-3 is a valuable prognostic marker in cardiovascular disease recognizing patients at risk. Most published results are from cohorts with chronic heart failure patients, but also in patients with acute heart failure, acute cardiac syndromes, as well as in cohorts from the general population. Galectin-3 levels were prognostic when looking at various endpoints, most prominently mortality, new onset heart failure and other cardiovascular endpoints. This review on galectin-3 provides an overview of the biological function of the marker and important findings from animal model studies and summarizes the key results of published analyses of clinical cohorts. The potential future role of galectin-3 is discussed. Zusammenfassung Galectin-3 ist ein Kohlenhydrat-bindendes Protein, welches an entzündlichen und fibrotischen Prozessen im Gewebe beteiligt ist. Die Aktivierung des Galectin-3 im Herzen ist eng mit der kardialen Fibrose, einer der Hauptgründe für das kardiale Remodeling, verknüpft. Klinische Studien konnten zeigen, dass Galectin-3 ein wertvoller prognostischer Marker für das frühzeitige Erkennen eines kardiovaskulären Erkrankungsrisikos ist. Die meisten Publikation stammen aus Studien mit chronischen Herzinsuffizienzpatienten, aber auch bei Patienten mit akuter Herzinsuffizienz, mit akutem kardialen Syndrom sowie in der Allgemeinbevölkerung lieferten erhöhte Galectin-3 Spiegel prognostische Informationen in Bezug vor allem auf Mortalität, Herzinsuffizienz und andere kardiovaskuläre Endpunkte. Dieser Galectin-3 Review-Artikel gibt einen Überblick über die biologische Funktion des Markers und die Erkenntnisse, die aus Tiermodellstudien gewonnen wurden. Die wichtigsten Ergebnisse der bisher veröffentlichten Studien sind zusammengefasst, und die mögliche zukünftige Rolle des Galectin-3 wird diskutiert.

Background: Owing to a growing interest in vitamin D, there has been an increasing demand for 25-hydroxyvitamin D (25[OH]D) measurements over the past few years warranting a critical evaluation of laboratory methods for 25(OH)D determinations. Therefore, the aim of this study was to compare four of the most frequently used routine assays for 25(OH)D. Methods: In 106 hypertensive patients (53±14 years; 59% females), derived from the Graz Endocrine Causes of Hypertension (GECOH) study, we measured 25(OH)D in serum and plasma by means of four automated immunoassays (DiaSorin Liaison, IDS iSYS, Abbott ARCHITECT, and Roche Cobas). Results: We observed a poor comparability between assay results with Pearson correlation coefficients between the different methods ranging from 0.57 to 0.85. Using a value of ≤20 ng/mL (50 nmol/L) as the cut-off for vitamin D deficiency, the percentages of vitamin D deficient patients was significantly different depending on the assay method: 79.2% (Abbott ARCHITECT), 50.0% (DiaSorin Liaison), 28.3% (IDS iSYS), and 23.6% (Roche Cobas). Conclusions: By comparing four frequently used automated immunoassays for 25(OH)D, we observed remarkable differences with a significant impact on vitamin D status classification. Clinicians and researchers must be aware of these assay differences and must aim for standardization of 25(OH)D measurements. Zusammenfassung Einleitung: Aufgrund eines steigenden Interesses am Vitamin D kam es in den letzten Jahren zu einer zunehmenden Nachfrage nach Bestimmungen des 25-Hydroxyvitamin D (25[OH]D). Dies erfordert auch eine kritische Evaluierung der Labormethodik, weswegen wir 4 der am häufigsten verwendeten Immuno-assays für das 25(OH)D miteinander verglichen haben. Methoden: Bei 106 hypertensiven PatientInnen (53±14 Jahren; 59% Frauen) der Graz Endocrine Causes of Hypertension (GECOH) Studie, wurde 25(OH)D im Serum und Plasma mit 4 automatisierten Immuno-Assays gemessen (DiaSorin Liaison, IDS iSYS, Abbott ARCHITECT, and Roche Cobas). Ergebnisse: Es zeigte sich eine schlechte Vergleichbarkeit zwischen den unterschiedlichen Assays mit Pearson Korrelationskoeffizienten zwischen den unterschiedlichen Methoden von 0,57 bis 0,85. Bei Verwendung eines cut-offs von ≤20 ng/mL (50 nmol/L) für die Definition eines Vitamin D Mangels, schwankte die Prävalenz des Vitamin D Mangels je nach verwendetem Assay: 79.2% (Abbott ARCHITECT), 50.0% (DiaSorin Liaison), 28.3% (IDS iSYS) und 23.6% (Roche Cobas). Schlussfolgerungen: Bei einem Vergleich von 4 häufig verwendeten automatisierten Immuno-Assays für das 25(OH)D fanden wir signifikante Unterschiede mit deutlichen Auswirkungen auf die Klassifikation des Vitamin D Status. Ärzte und Forscher müssen sich dieser Assay-Unterschiede bewusst sein und man muss unbedingt eine Standardisierung der 25(OH)D Messungen anstreben.

Background: Salivary cortisol is increasingly used in the diagnostic work-up of suspected Cushing’s disease as well as in stress research. In this study, the agreement of different methods for salivary cortisol measurement was assessed. Methods: Saliva samples from five healthy volunteers were distributed to three routine clinical chemistry laboratories. As a reference, all samples were also analyzed using liquid chromatography-tandem mass spectrometry involving stable isotope labeled cortisol for internal standardization in our laboratory. Results: All immunometric routine methods substantially overestimated salivary cortisol concentrations by approximately 50%. The agreement between these immunoassays was moderate with between-method coefficients of variation of up to 36% for individual samples. Conclusions: Standardization of salivary cortisol measurement requires substantial improvement, in particular by implementation of proficiency testing schemes, a defined reference method, and reference materials. Interpretation of salivary cortisol data in psycho-neuroendocrinological research has to consider the inappropriate level of standardization realized for salivary cortisol measurement to date. Zusammenfassung Einleitung: Die Bestimmung von Cortisol im Speichel wird immer häufiger für die Diagnostik des Hypercortisolismus (Morbus Cushing) herangezogen und findet außerdem Einsatz in der Stressforschung. In dieser Arbeit wird die Vergleichbarkeit von verschiedenen Methoden der Speichelcortisolbestimmung überprüft. Methoden: Speichelproben von fünf gesunden Freiwilligen wurden an drei klinische Routinelaboratorien versandt. Als Referenz wurden die Proben im eigenen Labor mittels Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie vermessen, wobei als Interner Standard stabil-isotopenmarkiertes Cortisol verwendet wurde. Ergebnisse: Alle immunometrischen Routinemethoden überschätzten die Speichelcortisolkonzentration erheblich um ca. 50%. Die Übereinstimmung zwischen den Immunoassays war mittelmäßig, mit Variationskoeffizienten einer individuellen Probe innerhalb der Methoden von bis zu 36%. Schlussfolgerung: Die Standardisierung der Bestimmung von Cortisol im Speichel muss deutlich verbessert werden, insbesondere durch die Einführung von Ringversuchen, durch eine definierte Referenzmethode und durch Referenzmaterialien. In der Psycho-Neuroendokrinologischen Forschung muss bei der Interpretation von Speichelcortisoldaten die ungenügende Standardisierung hinsichtlich der Speichelcortisol-Bestimmung berücksichtig werden.

Postgraduate training in Clinical Chemistry and Laboratory Medicine is heterogeneous in Europe. Physicians, scientists and pharmaceutics can undergo postgraduate training in Clinical Chemistry and Laboratory Medicine in Europe. There are differences in terms of duration and content of particular postgraduate training. Most challenging are the differences in the formal approval of degrees within and between countries in Europe. With regard to harmonization, quality assurance and standardization of postgraduate training in both sections of “Laboratory Medicine/Medical Biopathology” of the “European Union of Medical Specialists” (UEMS) and the “European Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine” (EFLM) passed a common and revised curriculum regarding postgraduate training in Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. The EFLM published the professional title “Specialist in Laboratory Medicine” (formerly “European Specialist in Clinical Chemistry and Laboratory Medicine”). The UEMS awarded the polyvalent degree “Specialist in General Laboratory Medicine – Polyvalent Medical Biopathology” as well as four monovalent degrees. The present article provides an overview of the current situation in postgraduate training in Clinical Chemistry and Laboratory Medicine in the member states of the European Union (EU) in comparison to Germany. Future goals of the UEMS and the EFLM as umbrella organizations for Clinical Chemistry and Laboratory Medicine in the EU are discussed.