Volume 4, Issue 1

Interferences in the clinical laboratory may lead physicians misinterpret results for some biological analytes. The most common analytical interferences in the clinical laboratory include hemolysis, icterus and lipemia. Lipemia is defined as turbidity in a sample caused by the accumulation of lipoproteins, mainly very-low density lipoproteins (VLDL) and chylomicrons. Several methods are available for the detection of lipemic samples, including the lipemic index, or triglyceride quantification in serum or plasma samples, or mean corpuscular hemoglobin (MCHC) concentration in blood samples. According to the European Directive 98/79/CE, it is the responsibility of clinical laboratories to monitor the presence of interfering substances that may affect the measurement of an analyte. There is an urgent need to standardize interference studies and the way interferences are reported by manufacturers. Several methods are currently available to remove interference from lipemia and enable accurate measurement of biological quantities. The clinical laboratory should establish a protocol for the handling of lipemic samples according to the biological quantity to be tested.

Resumen Las interferencias analíticas en el laboratorio clínico pueden causar errores en la interpretación de los resultados de diversas magnitudes biológicas por parte del médico peticionario. Las interferencias analíticas más frecuentemente observadas en el laboratorio clínico son la hemólisis, ictericia y lipemia. La lipemia se define como la turbidez de la muestra causada por la acumulación de lipoproteínas, principalmente lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL) y quilomicrones. Existen diversos métodos de detección de muestras lipémicas, como por ejemplo, el índice lipémico o la determinación de triglicéridos en muestras de suero o plasma o la Concentración de Hemoglobina Corpuscular Media (CHCM) en muestras de sangre. Las empresas de diagnóstico in vitro son las responsables, según la Directiva Europea 98/79/CE, de realizar el estudio de las sustancias interferentes que pueden afectar a la medición de una magnitud. Existe una necesidad urgente de estandarizar la forma en que se realizan y se reportan los estudios de interferencia por parte de los fabricantes. La interferencia por lipemia puede ser eliminada por diferentes métodos permitiendo la determinación de magnitudes biológicas de manera exacta. El laboratorio clínico debe decidir los protocolos de actuación ante muestras lipémicas dependiendo de la magnitud biológica que se quiere analizar.

Prenatal genetic diagnosis of monogenic diseases is a process involving the use of a variety of molecular techniques for the molecular characterization of a potential monogenic disease in the fetus during pregnancy. Prenatal genetic diagnosis can be performed through invasive and non-invasive methods. A distinction must be made between “NIPD” (non-invasive prenatal diagnosis), which is considered to be diagnostic, from “NIPT” (non-invasive prenatal test), which is a screening test that requires subsequent confirmation by invasive methods. The different techniques currently available aim at detecting either, previously characterized pathogenic mutations in the family, the risk haplotype associated with the familial mutation, or potential pathogenic mutation(s) in a gene associated with a diagnostic suspicion. An overview is provided of relevant aspects of prenatal genetic diagnosis of monogenic diseases. The objective of this paper is to describe the main molecular techniques currently available and used in clinical practice. A description is provided of the indications, limitations and analytical recommendations regarding these techniques, and the standards governing genetic counseling. Continuous rapid advances in the clinical applications of genomics have provided increased access to comprehensive molecular characterization. Laboratories are struggling to keep in pace with technology developments.

Resumen El diagnóstico genético prenatal de enfermedades monogénicas es un proceso que engloba el conjunto de técnicas moleculares dirigidas a caracterizar molecularmente una posible enfermedad monogénica en el feto durante el embarazo. Actualmente, el diagnóstico genético prenatal puede realizarse de manera invasiva o no invasiva. Debemos diferenciar “NIPD” (del inglés: non invasive prenatal diagnosis ) que se considera diagnóstico de “NIPT” (del inglés: non invasive prenatal test ) que se considera prueba de cribado y tendrá que confirmarse por técnicas invasivas. Las diferentes metodologías disponibles y empleadas pueden ir dirigidas a la detección de variante/s genética/s causal/es previamente caracterizada/s en la familia, la detección del haplotipo de riesgo asociado a la mutación familiar y/o la búsqueda de posibles variante/s patogénicas en un gen asociado a una sospecha diagnóstica. Se revisarán los aspectos relevantes del diagnóstico genético prenatal de las enfermedades monogénicas. El objetivo es la exposición de las principales técnicas moleculares disponibles y empleadas en la actualidad, detallando sus indicaciones, limitaciones y recomendaciones analíticas, así como la normativa que regula el asesoramiento genético. La evolución permanente y exponencial en la aplicación asistencial de las técnicas genómicas, facilita progresivamente el acceso a una caracterización molecular exhaustiva, obligando a una constante actualización homogénea de los laboratorios.

The proper clinical approach to a wide range of disorders relies on the availability of accurate, reproducible laboratory results for sexual steroids measured using methods with a high specificity and sensitivity. The chemiluminescent immunoassays currently available have analytical limitations with significant clinical implications. This position statement reviews the current limitations of laboratory techniques for the measurement of estradiol and testosterone and their impact on diverse clinical scenarios. A set of recommendations are provided to incorporate steroid hormone analysis by mass spectrometry in national health systems. International societies have recommended this methodology for a decade.

Resumen La correcta aproximación clínica a un amplio grupo de situaciones depende en gran medida de la disponibilidad de resultados analíticos de esteroides sexuales que sean exactos y reproducibles, obtenidos con métodos con la especificidad y sensibilidad analíticas adecuadas. En este sentido, los inmunoanálisis quimioluminiscentes actuales presentan limitaciones analíticas con repercusiones clínicas importantes. El documento de posicionamiento revisa el estado actual en la estandarización de los métodos de medida de estradiol y testosterona y su repercusión en distintas situaciones clínicas. Se incluye asimismo una serie de recomendaciones a seguir para introducir en los sistemas nacionales de salud los análisis de esteroides por espectrometría de masas, metodología recomendada desde hace más de una década por las sociedades internacionales.

Objectives Laboratory Medicine is a crucial discipline that contributes to the diagnosis, management and monitoring of patients. This branch of medicine faces two major challenges: New technologies and increased demand. There is limited information available of the state of affairs in Laboratory Medicine in Spain. This study provides a picture of clinical laboratories and clinical laboratory professionals. Methods The Spanish Society of Laboratory Medicine distributed a questionnaire among the 250 most representative centers (the ones with the largest volume of determinations and training programs), of which 174 (69.6%) returned the questionnaire providing data for 2019. Results Laboratories were classified according to the number of determinations. In total, 37% identified themselves as small (<1 million determinations per year); 40% considered themselves medium-sized (1–5 million determinations per year) and 23% considered they were large laboratories (>5 million determinations). The level of specialization of laboratory physicians and laboratory performance were higher in large laboratories. Most requests (87%) and determinations (93%) corresponded to biochemistry and hematology. As many as 63% of physicians had an indefinite contract, and 23% were older than 60 years. Conclusions Laboratory medicine is a consolidated discipline that is gaining relevance in Spain. It adds value to the diagnosis, prognosis and follow-up of diseases, and to treatment response monitoring. The results of this study will help us address challenges such as the need for specialized training for laboratory professionals; the emergence of technological innovations; exploitation of Big Data; optimization of quality management systems and patient safety.

Resumen Objetivos La medicina de laboratorio es una disciplina clave que contribuye al diagnóstico, terapia y seguimiento adecuado de los pacientes. Actualmente se enfrenta a grandes retos debido a la innovación tecnológica y al aumento de la demanda. Desafortunadamente hay una información limitada para comprender la situación actual en España. Este estudio pretende mostrar la situación de los laboratorios clínicos y de los profesionales de la medicina laboratorio. Métodos Desde la Sociedad Española de Medicina de Laboratorio se envió una encuesta a los 250 centros más representativos (mayor volumen y con programas formativos), de los cuales 174 (69,6%) respondieron con datos referidos a 2019. Resultados Los laboratorios se clasificaron en función del número de determinaciones. El 37% se consideraron pequeños (<1 millón de determinaciones al año), el 40% medianos (entre 1 y 5 millones de determinaciones al año) y el 23% grandes (>5 millones de determinaciones al año). El nivel de especialización de los facultativos y la eficiencia fueron mayores en los laboratorios grandes. La mayoría de las peticiones (87%) y determinaciones (93%) se concentraron en Bioquímica y Hematología. En relación con los facultativos, el 63% disponían de contrato fijo y el 23% superaban los 60 años. Conclusiones La medicina de laboratorio en España es una disciplina consolidada y en crecimiento, capaz de aportar valor al diagnóstico, pronóstico y seguimiento de enfermedades y sus tratamientos. El conocimiento del estado actual nos permitirá abordar retos tales como la necesidad de formación de profesionales, la innovación tecnológica, la aplicación del Big data, la optimización de los sistemas de gestión de calidad y la seguridad del paciente.

Objectives Acute myeloid leukemia (AML) is a highly heterogeneous disease. Although patients can be classified into risk groups based on their genetic changes, the prognosis of disease within these categories varies widely. This situation raises the need to search for new molecular markers related to AML. Serine peptidase inhibitor Kazal type 2 ( SPINK2 ) has recently been reported to be upregulated in AML and associated with poor outcomes by meta-analysis and in a limited number of AML patients. Methods We analyzed SPINK2 mRNA expression in 62 patients (45 adult and 17 pediatric) with AML and 11 cell lines using quantitative Real-Time PCR (qRT-PCR). SPINK2 protein level was determined using ELISA in cell lines. Results We found that the expression of SPINK2 mRNA and protein levels in AML cell lines (HL60 and NB4) have increased compared to other cell lines (K562, Jurkat and NALM6, MCF7, HeLa, HUVEC, hFOB, 293T, U87). SPINK2 mRNA expression was upregulated in patients with AML compared to controls (p=0.004) and significantly lower in t(8;21)-positive patients compared to negative patients (p=0.0006). Conclusions Our results suggest that SPINK2 serves an important role in AML development. Further studies are needed to evaluate SPINK2 expression in AML patients with t(8.21) and investigate to clarify its prognostic value in various subgroups of AML.

Resumen Objectivos La leucemia mieloide aguda (AML, por sus siglas en inglés) es una enfermedad muy heterogénea. Aunque se puede clasificar a los pacientes en grupos de riesgo según sus mutaciones genéticas, el pronóstico dentro de cada categoría varía sustancialmente. Es perentorio identificar nuevos marcadores moleculares de la AML. Recientemente, se ha descrito la elevación del inhibidor de la serina peptidasa Kazal tipo 2 ( SPINK2 ) en la AML, habiendo sido relacionada con peores resultados clínicos en metaanálisis, así como en un número limitado de pacientes con AML. Métodos Analizamos la expresión de SPINK2 en 62 pacientes (45 adultos y 17 niños) con AML y en 11 líneas celulares mediante PCR cuantitativa (qRT-PCR). Los niveles de la proteína SPINK2 se determinaron en líneas celulares mediante ELISA. Resultados Observamos un aumento de expresión del ARNm de SPINK2 y de los niveles de la proteína en las líneas celulares de AML (HL60 y NB4), frente a otras líneas celulares (K562, Jurkat y NALM6, MCF7, HeLa, HUVEC, hFOB, 293T, U87). Los pacientes con AML mostraron una expresión elevada de ARNm de SPINK2 frente a los controles (p=0,004) y esta fue significativamente menor en los pacientes t(8;21) positivos, frente a los pacientes negativos (p=0,0006). Conclusions Estos resultados sugieren que el gen SPINK2 tiene un papel relevante en el desarrollo de la AML. Son necesarios más estudios para evaluar la expresión de SPINK2 en los pacientes con AML con la mutación t(8.21) e investigar su valor pronóstico en varios subgrupos de pacientes con AML.

Objectives Diabetes mellitus intensify the risks and complications related to COVID-19 infection. A major effect of the pandemic has been a drastic reduction of in-person visits. The aim of this study was to evaluate the impact of the COVID-19 pandemic on HbA 1c management and results among pediatric and adult outpatients with diabetes, considering the laboratory and point-of-care testing (POCT) HbA 1c measurements. Methods Observational retrospective study including patients from pediatric and adult diabetes units was conducted. HbA 1c results obtained in the laboratory and POCT over 3 years (2019–2021) were collected from the laboratory information system. Results After the lockdown, the number of HbA 1c plummeted. Children returned soon to routine clinical practice. The number of HbA 1c increased gradually in adults, especially in POCT. Globally, HbA 1c results were lower in children compared with adults (p<0.001). HbA 1c values in children (p<0.001) and adults (p=0.002) decreased between pre-pandemic and post-pandemic periods, though lower than the HbA 1c reference change value. The percentage of HbA 1c results above 8% remained stable during the study period. Conclusions Continuous glucose monitoring and a telemedicine have been crucial, even allowing for improvements in HbA 1c results. During the lockdown, patients with better metabolic control were managed in the laboratory whereas patients with poorer control or a severe clinical situation were attended in diabetes units by POCT. Adults returned to pre-pandemic management slowly because they were more susceptible to morbidity and mortality due to COVID-19. Coordination among all health professionals has been essential to offering the best management, especially in difficult scenarios such as the COVID-19 pandemic.

Resumen Objetivos La diabetes mellitus incrementa los riesgos y complicaciones asociadas a la COVID-19. Una de las principales consecuencias de la pandemia ha sido la drástica reducción de las consultas presenciales. El objetivo de este estudio es evaluar el impacto que ha tenido la pandemia de COVID-19 en la gestión de la determinación de HbA 1c y sus resultados en pacientes ambulatorios adultos y pediátricos con diabetes, teniendo en cuenta tanto la medición realizada en el laboratorio como las pruebas de laboratorio en el lugar de asistencia o point-of-care testing (POCT). Métodos Se realizó un estudio observacional retrospectivo que incluyó pacientes de las Unidades de Diabetes Pediátrica y de Adultos. A través del sistema de información del laboratorio, se extrajeron los resultados de HbA 1c obtenidos en el laboratorio y los resultados de POCT en un periodo de tres años (2019–2021). Resultados El número de mediciones de HbA 1c se redujo considerablemente tras el confinamiento. En poco tiempo, los pacientes pediátricos volvieron a recibir su asistencia médica habitual. El número de mediciones de HbA 1c fue aumentando paulatinamente en los adultos, especialmente POCT. En general, los valores de HbA 1c fueron inferiores en los pacientes pediátricos que en los adultos (p<0,001). Los valores de HbA 1c en niños (p<0,001) y adultos (p=0,002) se redujeron tras la pandemia con respecto al periodo previo a la misma, aunque fueron inferiores al valor de referencia del cambio de la HbA 1c . El porcentaje de resultados de HbA 1c superiores al 8% se mantuvo estable durante el periodo de estudio. Conclusiones Los sistemas de monitorización continua de la glucosa y la telemedicina fueron cruciales, habiéndose producido incluso una mejoría respecto a los niveles de HbA 1c . Durante el confinamiento, a los pacientes con mejor control metabólico, las pruebas analíticas se les realizaron en el laboratorio, mientras que a los pacientes con peor control o una situación clínica grave se les realizaron mediante POCT en las Unidades de Diabetes. En los pacientes adultos, el retorno a la asistencia habitual previa a la pandemia se produjo de forma lenta y gradual, ya que presentaban mayor riesgo de morbimortalidad asociado a la COVID-19. La coordinación entre todos los profesionales sanitarios fue esencial a la hora de garantizar la mejor atención posible, especialmente en escenarios complejos, como la pandemia de COVID-19.

Objectives The incidence of congenital neuroblastoma has increased in the recent years. The purpose of this study was to describe the clinical and biochemical characteristics of cases of congenital neuroblastoma diagnosed in our center. Case presentation We report three cases of congenital neuroblastoma diagnosed in our hospital. In two, diagnosis was made prenatally, whereas the other case was detected in the immediate neonatal period. In the three cases, neuroblastoma was located in the abdominal region and exhibited elevated concentrations of catecholamines or their metabolites in single voided urine samples. Two tumors were classified as stage M, and one as stage L2. The N-MYC oncogen was not amplified in any of the cases studied. Histopathological analysis was favorable in the three cases. The tumor was resected in two patients. The three received chemotherapy. Conclusions The measurement of catecholamines and their metabolites is essential in the diagnosis of neuroblastoma. When 24 h urine cannot be collected, single voided urine can be used to calculate the index based on creatinine concentrations.

Resumen Objetivos La incidencia de neuroblastoma congénito se ha incrementado en los últimos años. El propósito de este artículo es presentar las características clínicas y bioquímicas de neuroblastomas congénitos diagnosticados en nuestro centro. Caso clínico Estudio de tres casos de neuroblastoma congénito diagnosticados en nuestro hospital. En dos casos el diagnóstico fue prenatal y en el otro fue detectado en el período neonatal inmediato. Los tres casos presentaron localización abdominal y valores de catecolaminas o sus metabolitos en orina de micción única elevados. Dos tumores se clasificaron como estadio M y uno como estadio L2. En ninguno de los pacientes estudiados se encontró amplificación del oncogén N-MYC ni presentaron características histopatológicas desfavorables. Se realizó exéresis del tumor en dos pacientes, y los tres recibieron quimioterapia. Conclusiones La medición de catecolaminas y sus metabolitos en orina es una parte fundamental del diagnóstico de neuroblastoma. En aquellos casos en los que no se puede recoger muestras de orina de 24 horas, se puede utilizar orina de micción única calculando el índice en función de la creatinina excretada.

Objectives Ureaplasma species are the most frequently isolated microorganisms in cases of spontaneous preterm labor, premature rupture of the membranes, or chorioamnionitis. Case presentation A woman at 28 +6 weeks of gestation with no apparent history of interest presented at the hospital with contractions. Upon suspicion of chorioamnionitis, the patient was admitted for a low segment transverse cesarean section, which was completed without any complications. The patient was discharged at 7 days. The newborn remained stable and showed no clinical signs of infection. However, on suspicion of chorioamnionitis, empirical treatment with intravenous ampicillin (2 g every 6 h) and gentamicin (5 mg/kg once daily) was initiated. Samples of pharyngeal/tonsillar, ear, and anal/rectal exudates were collected. At 24 h, all samples were positive for Ureaplasma parvum . Empirical treatment was suspended, and treatment with intravenous azithromycin was initiated (12 mg once daily). Endocervical and placental exudates were also positive for U. parvum . Fifty-two days after birth, the newborn was discharged. Conclusions The relationship between Ureaplasma spp. colonization and perinatal disease seem to be clear. However, the high frequency of vaginal Ureaplasma spp . colonization and high rates of term labor among pregnant women with this colonization make further studies necessary.

Resumen Objetivos Las especies de Ureaplasma son los microorganismos más frecuentemente relacionados con casos de parto prematuro espontáneo, rotura prematura de membranas o corioamnionitis. Caso clínico Gestante de 28 + 6 semanas, sin antecedentes personales de interés, que acude al hospital por contracciones. Ante la sospecha clínica de corioamnionitis ingresa para cesárea segmentaria transversa, transcurriendo sin nada reseñable y siendo dada de alta a los siete días del ingreso. El neonato permanece estable y sin datos clínicos de infección. No obstante, ante la sospecha clínica de corioamnionitis se pauta tratamiento empírico con ampicilina (2 g/6 h) y gentamicina (5 mg/kg/24 h) intravenosas y se toman muestras de exudados faríngeo/amigdalar, ótico y anal/rectal. A las 24 horas se detecta en todas las muestras Ureaplasma parvum , suspendiéndose el tratamiento empírico e iniciando azitromicina intravenosa (12 mg/24 h). También se detecta U. parvum en muestra de exudado endocervical y de placenta. Tras 52 días de ingreso el lactante es dado de alta. Conclusiones Aunque parece clara la relación entre la colonización por estos microorganismos y el desarrollo de enfermedad perinatal, el elevado porcentaje de colonización vaginal existente y el hecho de que la mayoría de embarazadas colonizadas den a luz a término, sin ningún tipo de complicación, hacen necesarios más estudios.